本試劑盒僅限用于科學(xué)研究,嚴(yán)禁用于醫(yī)學(xué)診斷。人白介素1 (IL-1) Elisa試劑盒的使用說(shuō)明書(shū)如下:
檢測(cè)原理
本試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。首先,將樣本、標(biāo)準(zhǔn)品和HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體依次加入預(yù)先包被adropin(AD)抗體的微孔中,隨后經(jīng)過(guò)溫育并徹底洗滌。通過(guò)底物TMB的顯色反應(yīng),在過(guò)氧化物酶的催化下,TMB轉(zhuǎn)化為藍(lán)色,并在酸的作用下進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為最終的黃色。顏色的深淺與樣本中的adropin(AD)濃度呈正相關(guān)。最后,使用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值)以計(jì)算樣本濃度。
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清: 使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作中避免任何細(xì)胞刺激。收集血液后,以3000轉(zhuǎn)速離心10分鐘,迅速小心地分離血清和紅細(xì)胞。
2. 血漿: 使用EDTA、檸檬酸鹽或肝素進(jìn)行抗凝處理,3000轉(zhuǎn)速離心30分鐘,取上清。
3. 細(xì)胞上清液: 以3000轉(zhuǎn)速離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿: 將組織加入適量生理鹽水進(jìn)行搗碎,3000轉(zhuǎn)速離心10分鐘取上清。
5. 保存: 如果樣本收集后未及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,并存放于-20℃以防止反復(fù)凍融。待檢測(cè)時(shí),確保在室溫下徹底解凍并均勻混合樣品。
自備物品操作注意事項(xiàng)
注:標(biāo)準(zhǔn)品(S0-S5)濃度依次為:0、25、50、100、200、400pg/mL。
試劑的準(zhǔn)備
20×洗滌緩沖液的稀釋?zhuān)赫麴s水按1:20比例稀釋?zhuān)?份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。洗板方案請(qǐng)參考相關(guān)指南。
操作步驟及結(jié)果判斷
通過(guò)在Excel工作表中繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn):以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),繪制線(xiàn)性回歸曲線(xiàn),依據(jù)曲線(xiàn)方程計(jì)算各樣本濃度值。
試劑盒性能免責(zé)聲明
使用本試劑盒可獲得高可靠性的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,推薦使用新葡萄8883官網(wǎng)AMG系列產(chǎn)品,以確保實(shí)驗(yàn)的精準(zhǔn)性和有效性。