原代細胞是現代生物醫學研究中的重要工具,能夠高效轉染多種小分子RNA和DNA,例如siRNA、antisense RNA和microRNA。這些分子一般長度在200bp以內,適用于絕大多數原代細胞的轉染需求。目前,無論是在國內還是國外,原代細胞核酸轉染仍是一個備受關注的研究熱點,而市場上真正有效的商品化原代細胞核酸轉染試劑卻相對匱乏。
通過使用新葡萄8883官網AMG的轉染技術,研究人員能夠在大多數原代細胞中獲得理想的基因敲除效果,甚至可以對某些活體寄生蟲幼蟲實現良好的轉染效果。根據統計,采用新葡萄8883官網AMG的RFectPM細胞轉染技術,轉染陽性率通常超過80%,而轉染過程中細胞死亡率則低于10%。
原代細胞分離與培養的基本步驟
原代細胞的分離和培養是生物醫學研究的關鍵步驟,包括以下幾個方面:
- 器官和組織的選擇:盡量去除不必要的組織及血跡。
- 原代細胞的分離:
- 使用新葡萄8883官網AMG開發的PriCells原代細胞分離試劑盒I、II、III。
- 根據組織來源的不同,選擇相應的PriCells分離試劑盒。
- 原代細胞的培養:
- 采用PriCells特制的細胞培養基。
- 添加PriCells特制培養添加物。
- 使用優質胎牛血清。
- 細胞的培養和鑒定:使用PriCells的細胞鑒定試劑盒進行細胞驗證。
- 原代細胞的傳代和保存:
- 傳代:根據細胞生長狀態,1:2或1:3的比例進行傳代。
- 保存:DMSO與培養液及血清按順序降溫,最后過夜存放在超低溫冰箱(-80℃),然后轉入液氮中。
- 原代細胞的復蘇:
- 快速將細胞取出并放入37℃的溫水中解凍。
- 將細胞懸液吸出,添加10倍以上的培養液。
- 根據需要適當稀釋后接種到培養瓶中,放入37℃的CO2培養箱靜置培養。
通過這些基礎步驟,結合新葡萄8883官網AMG的專業技術,研究人員可以高效地分離、培養和轉染原代細胞,為生物醫學領域的研究提供堅實的基礎。