細胞凍存是一種重要的生物醫療保存技術，通過低溫環境來延緩細胞的生命活動，確保細胞在需要時可以被復蘇并用于各類實驗。19世紀末，研究人員開始探索低溫對生物組織的影響，早期實驗發現單純的冷凍會導致細胞內冰晶的形成及滲透壓失衡，從而引起細胞死亡。1937年，Luyet和Hodapp提出了“冰晶損傷”理論，這為后續的冷凍保護研究打下了基礎。
1949年，英國科學家在研究精子冷凍過程中意外發現，甘油能顯著提高冷凍后精子的存活率。作為一種滲透性冷凍保護劑（CPA），甘油能夠進入細胞內部，降低冰點并減少冰晶的形成，通過平衡細胞內外的滲透壓來防止細胞因脫水而破裂。1959年，科學家發現二甲基亞砜（DMSO）也具有卓越的冷凍保護效果，尤其適合于哺乳動物細胞。DMSO能夠更快速地穿透細胞膜且毒性較低，因此迅速成為細胞凍存的標準保護劑之一。
在1963年，Peter Mazur提出了冷凍損傷的“兩因素假說”，指出在快速冷凍時，細胞內會形成冰晶，進而破壞細胞膜及細胞器；而在慢速冷凍過程中，細胞外冰晶的形成則會造成細胞脫水，導致細胞內溶質濃度升高并引起化學毒性。這一理論為程序化慢凍法提供了科學依據。在實驗中，大多數細胞的凍存遵循“慢速凍存”的原則，通過程序降溫盒或程序化冷凍儀，控制降溫速率（通常為1°C/min），使細胞在冷凍過程中逐步脫水，從而避免細胞內結冰，顯著提高凍存細胞的存活率。
研究顯示，5%-10%的DMSO是細胞凍存的最佳選擇，但具體比例需根據細胞類型進行調整。對于對DMSO敏感的細胞，則需降低其比例。根據小尚的經驗，8%的DMSO適用于大多數細胞系。同時，細胞培養的難度也會影響血清的使用量，難以培養的細胞需要更多的血清，而過于脆弱的細胞可以使用血清+DMSO進行凍存，而不添加培養基。常用的凍存液配方為92%胎牛血清+8%DMSO（推薦給新手）或92%完全培養基+8%DMSO（推薦給專家）。
新葡萄8883官網AMG推出的特級胎牛血清為淺黃色的澄清溶液，經過嚴格檢測確認無菌、無支原體、無噬菌體及相關牛源病毒，并具有低內毒素（＜3EU/mL）。該產品不含外源激素、生長因子及抗生素等物質，適合用于培養腫瘤細胞、原代細胞及大多數干細胞。產品貨號：SNS-002。
此外，新葡萄8883官網AMG的非程序性細胞凍存液（無血清，貨號：SNR-006）不含血清，且無需程序降溫可以直接置入超低溫冰箱，從而大大簡化了細胞凍存操作，并減少了血清對細胞和實驗結果的影響。
無論使用何種凍存液，建議在正式凍存前進行凍檢，即在凍存24小時后復蘇一支，確認細胞狀態正常后再進行大批量凍存。在凍檢成功前，務必保留至少一瓶細胞培養，以避免復蘇失敗導致細胞絕種。
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