新葡萄8883官網AMG在ELISA實驗中，動物血清封閉劑的作用原理及特性如下：
一、作用原理
機械填補與吸附覆蓋：動物血清中的蛋白質通過物理吸附，填充固相載體（如ELISA板）表面的空隙，阻止后續抗體與未被封閉位置的非特異性結合。血清中的抗體優先與樣本中的Fc受體結合，從而減少一抗和二抗的假陽性信號。
雙重封閉機制：
普通蛋白封閉：血清中的白蛋白等成分封閉未包被的疏水區域，類似BSA的作用。
Fc受體封閉：血清內源性IgG可阻斷樣本中Fc受體與檢測抗體之間的非特異性結合。
二、核心特性
特性說明：
種屬匹配性：需與二抗來源一致（如二抗為羊抗兔，則應選用羊血清），以避免交叉反應。
成分復雜性：含多種蛋白（如IgG、白蛋白等），提供更全面的封閉效果，但可能引入干擾（如生物素酶系統禁用）。
低毒性：優質血清經過去補體處理，減少對細胞或酶的抑制作用。
三、對比其他封閉劑
與BSA對比：
優勢：血清可以封閉Fc受體，適合高Fc受體樣本（如組織勻漿）。
劣勢：成本較高，成分復雜可能導致背景波動。
與脫脂奶粉對比：
血清不含奶粉中的生物素或磷酸酶，適用于更廣泛的檢測系統。
四、使用注意事項
濃度優化：常用5%-10%濃度，需通過預實驗確定最佳信噪比。
避免干擾：含疊氮鈉的血清不可用于HRP標記系統（會抑制酶活性）。凍存血清需避免反復凍融，以防止蛋白降解。
替代方案：對Fc受體敏感的實驗可以考慮使用Fab片段作為二抗封閉。
五、典型應用場景
免疫組化/熒光：優先使用同源血清以降低背景噪音。
高Fc受體樣本：適用于血液、脾臟組織等的檢測。
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